O kit de amplificação rápida isotérmica de DNA da Mira utiliza a tecnologia avançada de amplificação de ácido nucleico na temperatura ambiente e uma temperatura constante (normalmente 39ºC a 42ºC). Com a assistência de proteínas auxiliares e proteínas de ligação de fita única, a recombinase e os iniciadores formam um complexo que procura e se liga ao domínio da homologia alvo. Isso resulta na formação de uma região D-loop no local homólogo, iniciando a troca de fios. À medida que a recombinase se dissocia do complexo, a polimerase se liga à extremidade 3 'do iniciador, iniciando o processo de extensão da cadeia. Além disso, ao alavancar a atividade da exonuclease, o kit usa sondas moleculares específicas projetadas para o modelo, permitindo o monitoramento em tempo real do processo de amplificação do fragmento de alvo por meio de equipamentos de detecção de fluorescência.
【Características】
Alta sensibilidade
O kit oferece excelente sensibilidade e especificidade para a amplificação do ácido nucleico.
Tempo de reação rápida
O processo de amplificação leva apenas 20 minutos, fornecendo resultados rápidos.
Armazenamento e manuseio convenientes
Os componentes da reação estão em pó seco, fáceis de armazenar e manusear.
Ampla compatibilidade
Compatível com vários instrumentos quantitativos de PCR quantitativos de fluorescência, sistemas de amplificação de fluorescência de temperatura constante.
【Design de primer】
Para um desempenho ideal, os iniciadores devem ter 30-35 bp em comprimento. Os iniciadores curtos podem reduzir a velocidade de amplificação e a sensibilidade à detecção. Os projetos de iniciadores devem evitar estruturas secundárias que possam impedir a amplificação. O comprimento do amplicon recomendado é 150-300 bp.
【Projeto de sonda fluorescente】
A sonda fluorescente não deve se sobrepor ao site de reconhecimento de iniciadores específico. Deve ter 46-52 nt em comprimento, evitando sequências palindrômicas, estruturas secundárias internas e bases repetidas contínuas. O design da sonda inclui quatro sites de modificação:
- A dspacer(tetra -hidrofurano, THF) em aproximadamente 30-35 nt da extremidade 5 ', atuando como um local de reconhecimento para exonuclease.
- A grupo fluorescenteé rotulado a montante do site THF.
- A grupo de extinçãoestá posicionado a jusante, 2-4 nt, além do grupo fluorescente.
- O final de 3 'da sonda é rotulado com umgrupo de bloqueio(por exemplo, um grupo de amina, grupo de fosfato, ou C 3- espaçador), com o THF a aproximadamente 15 nt da extremidade 3 '.
【Composição do kit】
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Composição |
Conte |
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Um buffer |
1,6 ml × 1tube |
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B tampão |
150μL × 1Tube |
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PModelo de controle ositivo |
100μL × 1Tube |
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PControle asitivosonda ecartilha MIx |
70μL × 1Tube |
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Reagente |
48T |
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Manual do guia |
1copy |
【Especificações de embalagem】
- Especificações: 48 t/pack
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