Este kit utiliza a tecnologia de amplificação de ácido nucleico isotérmico que opera à temperatura ambiente e uma faixa de temperatura constante (normalmente 39 graus a 42 graus). O processo começa com a transcriptase reversa sintetizando o DNA complementar (cDNA) a partir de modelos de RNA usando iniciadores específicos. O complexo formado por recombinase e iniciadores, auxiliado por proteínas auxiliares e proteínas de ligação de fita única, procuram e se liga ao domínio da homologia alvo. Isso resulta na formação de uma região D-loop no local homólogo, iniciando a troca de fios. Uma vez que a recombinase se dissocia, a polimerase se liga à extremidade 3 'do iniciador, iniciando a extensão da cadeia. O kit também utiliza atividade de exonuclease e sondas moleculares específicas para o monitoramento em tempo real do processo de amplificação por meio de equipamentos de detecção de fluorescência.
【Características】
Alta sensibilidade
Projetado para amplificação precisa do RNA, garantindo detecção precisa.
Rápido
A reação completa em apenas 20 minutos, oferecendo amplificação rápida.
Estável
O formato de pó seco simplifica o manuseio e o armazenamento.
Ampla compatibilidade
Compatível com uma gama de instrumentos quantitativos de PCR quantitativos de fluorescência, amplificadores de fluorescência de temperatura constante e outros dispositivos de detecção de fluorescência.
【Design de primer】
Para um desempenho ideal, os iniciadores devem ter de 30 a 35 pb de comprimento. Os iniciadores mais curtos podem afetar a velocidade e a sensibilidade da amplificação. Os iniciadores são projetados para evitar estruturas secundárias que possam impedir o processo de amplificação. O comprimento do amplicon recomendado está entre 150 e 500 pb.
【Projeto de sonda fluorescente】
A sequência da sonda não se sobrepõe ao local de reconhecimento de iniciadores específico, o comprimento é 46-52 nt, e a sequência evita sequência palindrômica, estrutura secundária interna e bases repetidas contínuas. site de reconhecimento para exonuclease; Um grupo fluorescente é marcado a montante do local THF, um grupo de extinção é rotulado a jusante e a distância entre os dois grupos é 2-4 nt; THF está a cerca de 15 nt da extremidade 3 'e a extremidade 3' é rotulada com um grupo de bloqueio, como um grupo de amina, um grupo fosfato ou um espaçador C 3-.
【Composição do kit】
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Composição |
Conte |
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Um buffer |
1,6 ml × 1tube |
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B buffer |
150 μL × 1Tube |
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Reagente |
48T |
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Manual do guia |
1copy |
Observação:Considerando o problema da degradação do ácido nucleico, os produtos da série RNA não fornecem modelos de controle positivos e sondas de iniciadores.
【Especificações de embalagem】
- Especificações: 48 t/pack
【Karmazenamento de TI】
- Condições de armazenamento: Armazene em menos ou igual a -20 ºC em um ambiente de temperatura constante. Mantenha -se longe da luz e evite forte pressão.
- Vida de validade: 14 meses.
【Observação】
- Os iniciadores/sondas auto-projetados devem ser adicionados para o desenvolvimento do projeto MIRA.
- O kit está disponível em dois tipos - DNA e RNA. O tipo de RNA inclui transcriptase reversa, permitindo amplificação com RNA, dsDNA e ssDNA como modelos. O tipo de DNA só pode ampliar com o dsDNA como modelo.
- Disponível em três tipos - Faixa básica, fluorescente e de teste. Escolha o kit apropriado com base nas suas necessidades e use os iniciadores/sondas correspondentes.
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