Este kit utiliza tecnologia de amplificação rápida de ácido nucleico à temperatura ambiente ou temperatura constante (normalmente 39ºC - 42ºC). A transcriptase reversa usa iniciadores específicos e modelos de RNA para sintetizar fios de cDNA. A recombinase e os iniciadores, auxiliados por proteínas auxiliares e proteínas de ligação de fita única, formam um complexo que procura e se liga à região de homologia alvo. Isso resulta na formação de um loop D, iniciando a troca de fios. Uma vez que a recombinase se dissocia, a polimerase se liga à extremidade 3 'do iniciador e inicia a extensão da corrente. Com a ação da enzima NFO, uma sonda molecular específica, projetada de acordo com o modelo, é adicionada e a tecnologia de ouro coloidal (método sanduíche) é usada para detectar o resultado final.
【Características】
Alta sensibilidade, forte especificidade e tempo de reação curta (apenas 15 minutos), e os componentes da reação estão no estado de pó seco, o que é fácil de operar e fácil de armazenar.
Esse reagente possui baixos requisitos de equipamento e a operação de reação pode ser realizada em banhos de metal, banhos de água etc., e não há necessidade de comprar equipamentos exclusivos caros, como amplificadores de PCR.
STrongEspecificidade
Este kit oferece excelente desempenho para amplificação precisa do ácido nucleico.
Reação rápida
A reação completa em apenas 15 minutos.
Conveniente
Os componentes estão em forma de pó seco, facilitando o armazenamento e o manuseio.
Simples rEquado
Adequado para uso com equipamentos básicos, como banhos de metal ou água, sem a necessidade de amplificadores de PCR caros.
【Design de primer】
Recomenda -se usar iniciadores com um comprimento de 30-35 bp.too iniciadores curtos afetará a velocidade de amplificação e a sensibilidade à detecção;o final 5 'doprimer reversoé rotulado com um grupo de modificação (Biotina comumente usada).Os iniciadores são projetados para evitar a formação de estruturas secundárias que afetam a amplificação; o comprimento do amplicon é recomendado para ser 150-500 bp.
【Projeto de sonda fluorescente】
Projete uma sequência de sonda de 46-52 nt, complementar ao fragmento alvo, localizado entre os iniciadores a montante e reverso.
- UmTag de antígeno(normalmente FAM) é rotulado na extremidade 5 '.
- A dspacer(Tetra -hidrofurano, THF) é colocado no meio da sonda (entre as extremidades 5 'e 3'), atuando como o local de reconhecimento da enzima NFO.
- O3 'finalé rotulado com um grupo de modificação, como um grupo de amina, grupo de fosfato, ou C 3- espaçador.
【Composição do kit】
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Composição |
Conte |
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ADbuffer |
1,6 ml × 1tube |
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B buffer |
150μL × 1Tube |
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Reagente |
48 T |
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Manual do guia |
1 cópia |
Observação:Considerando o problema da degradação do ácido nucleico, os produtos da série RNA não fornecem modelos e iniciadores de controle positivos.
【Especificações de embalagem】
- Especificações: 48 t/pack
【Karmazenamento de TI】
- Condições de armazenamento: Armazene no grau -20 antes de abrir o pacote.
- Lifetadiga: 14 meses.
【Observação】
- Os iniciadores/sondas auto-projetados devem ser adicionados para o desenvolvimento do projeto MIRA.
- O kit está disponível em dois tipos - DNA e RNA. O tipo de RNA inclui transcriptase reversa, permitindo amplificação com RNA, dsDNA e ssDNA como modelos. O tipo de DNA só pode ampliar com o dsDNA como modelo.
- Disponível em três tipos - Faixa básica, fluorescente e de teste. Escolha o kit apropriado com base nas suas necessidades e use os iniciadores/sondas correspondentes.
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